<html>
<head>
<meta http-equiv="Content-Type" content="text/html; charset=us-ascii">
<style type="text/css" style="display:none"><!--P{margin-top:0;margin-bottom:0;} .ms-cui-menu {background-color:#ffffff;border:1px rgb(171, 171, 171) solid;font-family:'Microsoft YaHei UI', 'Microsoft YaHei', ????, SimSun, ??, sans-serif;font-size:11pt;color:rgb(51, 51, 51);} .ms-cui-menusection-title {display:none;} .ms-cui-ctl {vertical-align:text-top;text-decoration:none;color:rgb(51, 51, 51);} .ms-cui-ctl-on {background-color:rgb(223, 237, 250);opacity: 0.8;} .ms-cui-img-cont-float {display:inline-block;margin-top:2px} .ms-cui-smenu-inner {padding-top:0px;} .ms-owa-paste-option-icon {margin: 2px 4px 0px 4px;vertical-align:sub;padding-bottom: 2px;display:inline-block;} .ms-rtePasteFlyout-option:hover {background-color:rgb(223, 237, 250) !important;opacity:1 !important;} .ms-rtePasteFlyout-option {padding:8px 4px 8px 4px;outline:none;} .ms-cui-menusection {float:left; width:85px;height:24px;overflow:hidden}.wf {speak:none; font-weight:normal; font-variant:normal; text-transform:none; -webkit-font-smoothing:antialiased; vertical-align:middle; display:inline-block;}.wf-family-owa {font-family:'o365Icons'}@font-face {  font-family:'o365IconsIE8';  src:url('prem/15.0.898.11/resources/styles/office365icons.ie8.eot?#iefix') format('embedded-opentype'),         url('prem/15.0.898.11/resources/styles/office365icons.ie8.woff') format('woff'),         url('prem/15.0.898.11/resources/styles/office365icons.ie8.ttf') format('truetype');  font-weight:normal;  font-style:normal;}@font-face {  font-family:'o365IconsMouse';  src:url('prem/15.0.898.11/resources/styles/office365icons.mouse.eot?#iefix') format('embedded-opentype'),         url('prem/15.0.898.11/resources/styles/office365icons.mouse.woff') format('woff'),         url('prem/15.0.898.11/resources/styles/office365icons.mouse.ttf') format('truetype');  font-weight:normal;  font-style:normal;}.wf-family-owa {font-family:'o365IconsMouse'}.ie8 .wf-family-owa {font-family:'o365IconsIE8'}.ie8 .wf-owa-play-large:before {content:'\e254';}.notIE8 .wf-owa-play-large:before {content:'\e054';}.ie8 .wf-owa-play-large {color:#FFFFFF/*$WFWhiteColor*/;}.notIE8 .wf-owa-play-large {border-color:#FFFFFF/*$WFWhiteColor*/; width:1.4em; height:1.4em; border-width:.1em; border-style:solid; border-radius:.8em; text-align:center; box-sizing:border-box; -moz-box-sizing:border-box; padding:0.1em; color:#FFFFFF/*$WFWhiteColor*/;}.ie8 .wf-size-play-large {width:40px; height:40px; font-size:30px}.notIE8 .wf-size-play-large {width:40px; height:40px; font-size:30px}--></style>
</head>
<body>
<div style="font-size:12pt;color:#000000;background-color:#FFFFFF;font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif;">
<p><span style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">Hi,&nbsp;</span></p>
<p><span style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;"><br>
</span></p>
<p><span style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">&nbsp;I am trying to use khmer to diginorm my illumina data and I&nbsp;have some questions about it:&nbsp;</span><br style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">
<br style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">
<span style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">1.&nbsp;I diginormed my data following the Eel Pond mRNAseq Protocol. The N50 of the&nbsp;assembly&nbsp;is 1242, smaller
 than the assembly from the non-diginormed data, and also the number of the contigs is half of the non-diginormed. Is this normal that both&nbsp;assembly size and N50&nbsp;becomes&nbsp;smaller?</span><br style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">
<br style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">
<span style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">2.&nbsp;Because I got the data with adapter trimmed off, so I passed the step 1 and directly went to the
 interleave step. Does this cause any problems in the downstream process?</span><br style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">
<br style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">
<span style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">&nbsp;3. After splitting the *.pe file into left.fq and right.fq, the left.fq has a size of 1.7gb, and thr
 right.fq 1.4gb. Is this okay?</span><br style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">
<br style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">
<span style="color: #282828; font-family: 'microsoft yahei ui', 'microsoft yahei', &#24494;&#36719;&#38597;&#40657;, simsun, &#23435;&#20307;, sans-serif; font-size: 15px; background-color: #ffffff;">Thank you very much. I appreciate your time and patience.</span><br>
</p>
<div>
<p><br>
</p>
<div style="font-family: tahoma; font-size: 13px;">
<div style="font-family: tahoma; font-size: 13px;">
<p>Shu Chen</p>
<p>Ph.D. Student</p>
<p>Department of Agronomy and Soils</p>
<p>RM 165, Funchess Hall </p>
</div>
</div>
</div>
</div>
</body>
</html>